脂肪酸是一类一端含有一个羧基的长的脂肪族碳氢链的有机物。脂肪酸可以分为饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸,而根据双键位置的不同,不饱和脂肪酸又可分为ω-3, ω-6, ω-9系等等。脂肪酸在有充足氧供给的情况下,可氧化分解为二氧化碳和水,释放大量能量,是机体主要能量来源之一。脂肪酸β-氧化是体内脂肪酸分解的主要途径,脂肪酸氧化不但为机体提供了大量的能量,同时也生成了大量的体内化合物合成的中间原料乙酰CoA。脂肪酸在大部分组织中可以彻底氧化生成二氧化碳和水,但在肝脏中,脂肪酸的氧化很不完全,经常生成一些中间代谢产物,如乙酰乙酸、β-羟基丁酸和丙酮等酮体。脂肪酸不仅为营养所必需,而且与儿童生长发育和成长健康有关,还具有降血脂、防治冠心病等治疗作用,且与智力发育、记忆等生理功能有一定关系。

在生物样本中游离脂肪酸仅占总脂肪酸的10%,且其含量低且动态波动范围较宽,一次性在生物样本中同时检测和定量尽可能多的游离脂肪酸是一份比较具有挑战的分析工作。我们使用GC-MS、LC-MS/MS两种平台可定性定量检测尿液、全血/血清/血浆等生物样本中的全谱游离脂肪酸,通过检测游离脂肪酸水平来反映机体的脂质代谢、糖代谢及内分泌功能状态,对探索疾病的发病机理及防治有十分重要的意义。

1. 采用GC-MS平台,部分检测列表如下:

2. 采用LC-MS/MS平台,部分检测列表如下:

技术优势:

  • 高通量绝对定量检测中长链脂肪酸;
  • 游离脂肪酸常用于评估某种状态下脂肪酸的代谢水平,但因有些游离脂肪酸含量低而动态范围较宽而增加检测难度,本方法构建标准品不同线性范围可定量高低浓度代谢物,同时采用同位素内标校正,确保结果准确性;
  • 本方法着重关注细胞膜与脂质结合的脂肪酸水解后总脂肪酸水平,可以准确反映一段时间内脂肪酸的积累效应,从而判断脂肪酸的静态水平。

检测流程:

样本数要求:

细胞/微生物样本每组至少6个生物学重复;

模式动物/植物样本每组至少10个生物学重复;

临床样本一般每组至少50个生物学重复(严格控制患者入组条件)。

样本量要求:

血:100 µL

组织:50 mg

新鲜粪便:50 mg

冻干粪便:5 mg

细胞:1E7

样本运输:

干冰运输,按5公斤/天准备

客户应用案例:

1) Linjing Zhao, Yan Ni, et al. A panel of free fatty acid ratios to predict the development of metabolic abnormalities in healthy obese individuals. Sci Rep. 2016, 6: 28418. (IF=5.2)

2) Xiaojiao Zheng, Tianlu Chen, et al. The Brain Metabolome of Male Rats across the Lifespan. Sci Rep, 2016, 6: 24125. (IF=5.2)

3) Yan Ni, Linjing Zhao, et al. Circulating Unsaturated Fatty Acids Delineate the Metabolic Status of Obese Individuals. EBioMedicine, 2015, 2(10): 1513-22. (IF=6.68)

4) Xiaojiao Zheng, Yunping Qiu, et al. A targeted metabolomic protocol for short-chain fatty acids and branched-chain amino acids. Metabolomics, 2013, 9(4): 818-27. (IF=3.7)